- 關于胎牛血清是什么采集過程如何的問題，這里有答案
- 點擊次數(shù)：3469 更新時間：2020-10-16
- 血清通常在細胞培養(yǎng)中作為基礎生長培養(yǎng)基的添加劑。常用血清是胎牛血清（FBS），也稱FCS。胎牛血清是從適合人類衛(wèi)生習慣的農場收集的。有時，也可能用其他的牛血清，如新生牛血清或者供體牛血清。在細胞培養(yǎng)中，血清供應了豐富的高分子蛋白，低分子量營養(yǎng)物，疏水載體蛋白和其他體外細胞生長必要的成分如激素和粘附因子。同時，血清可以增加培養(yǎng)基的緩沖能力或中和有毒成分，起到保護細胞的作用。在細胞培養(yǎng)過程中是否選擇添加血清，主要根據(jù)基礎培養(yǎng)基化學成分，培養(yǎng)細胞的類型和培養(yǎng)體系而定。1、采集在胎牛血清生產(chǎn)過程中，全血使用無菌一次性塑料袋收集，待凝結后分離，收集和冷凍儲存血清。控制胎牛血清的初始收集是控制終血清產(chǎn)品質量的關鍵因素。只有初始原料符合我們的規(guī)范時才能允許生產(chǎn)。2、血清原料在市場存在兩個胎牛血清標準:美國農業(yè)部標準（USDA）和歐洲標準。美國農業(yè)部標準，原始血清必須采自未發(fā)生瘋牛病（BSE）和口蹄疫（FMD）疫情的國家，才可自由進口到任何國家，用于安全生產(chǎn)。而且研究者只有使用符合這種標準的血清，才被允許將其細胞和細胞產(chǎn)品送至其他同樣有嚴格進口條款的國家，進行合作交流。3、處理過程優(yōu)選數(shù)個批次凍存血清進行解凍，檢驗其內毒素和血紅素的含量，滿足標準的才能在冷藏條件下充分混合繼續(xù)加工，進一步進行過濾除菌。BioInd依次通過預過濾和膜過濾來處理胎牛血清。zui后的過濾步驟為連續(xù)三次用100nm的濾膜過濾。過濾結束，血清采用無菌工藝進行分裝，整個過程有效確保zui終產(chǎn)品無菌。血清生產(chǎn)的空氣潔凈度為100級。所有分裝工作臺都通過高效微?？諝膺^濾器過濾，并保持正壓分裝環(huán)境，對總微粒、懸浮微粒數(shù)和壓力進行監(jiān)控。分裝后，終產(chǎn)品迅速-20度凍存，并隔離，直到所有的質量控制檢測完成。4、FBS質量控制每批胎牛血清檢測確認符合各項標準，并以書面的方式記錄在質檢報告中。具體優(yōu)勢：本胎牛血清不僅適用于常規(guī)的細胞培養(yǎng)，更適合用于一些要求較高的細胞的培養(yǎng)。血清憑借其優(yōu)良的品質、*的可靠性和良好的技術支持，贏得廣大研究人員的信任。本胎牛血清從血液收集到終產(chǎn)品檢驗和審核的每一個步驟，都采用設備和標準操作程序，保證高品質和各批次的一致性。所有操作符合GMP (Good Manufacturing Practices for Drug)標準。本產(chǎn)品符合美國的FDA質量體系要求，pH值、滲透壓、血紅蛋白濃度、內毒素水平、總蛋白等多項指標檢測合格，無細菌、真菌、支原體及病毒污染，具有高質量和高穩(wěn)定性。本胎牛血清來源清晰，具有可追溯性。本血清來源于澳洲。本胎牛血清為*制品，不含任何人為的添加成分，可應用于各種常規(guī)的細胞培養(yǎng)，特別適合于一些要求較高的細胞的培養(yǎng)，為細胞提供必須的營養(yǎng)物質和多種生長因子，有效促進細胞生長。胎牛血清使用中的常見問題（不*整理）1、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?，再放回冷凍?/div>2、血清中包含絮狀沉淀，它們是什么，怎么處理？沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會影響產(chǎn)品性質。要除去沉淀，離心血清(400g，1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以，使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃，沉淀會自然消失。3、實驗室如何選擇適合的血清？國內一致認為HYCLONE的血清是好的，但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷，國外一般認為GIBCO比HYCLONE好，所以并不是價格決定質量，但是總的來說這兩種價格普遍偏貴，一般不是太嬌氣的細胞，國產(chǎn)的就夠用了。此外，由于國內HYCLONE，GIBCO并沒有生產(chǎn)線，我們只能從代理商那里買，而代理商又魚龍混雜，所以買到假貨的可能性也很大。所以，我一般會從直銷員那里買血清，有的國外生物公司由于剛剛進入中國，度不高，但是其實在國外已經(jīng)做得很不錯了，如Wisent等，他們在國內有辦事處，我會從那里拿，血清的品質和HYCLONE不相上下，但價格相對優(yōu)惠很多。4、 如何避免血清中產(chǎn)生沉淀？按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：(1)解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。(2) 血清分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。(4) 勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質。(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。(6) 若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。
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